效勝實(shí)業(yè)河南專業(yè)科研細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)石蠟切片/冰凍切片實(shí)驗(yàn)
本公司開展了石蠟包埋、石蠟切片、冰凍切片、HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫組化,免疫熒光,WB .PCR.透射電鏡,掃描電鏡,細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)服務(wù)服務(wù)介紹
1)技術(shù)原理:
石蠟切片(paraffin section)是組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法,而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中;畹募(xì)胞或組織多為無色透明,各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出;組織離開機(jī)體后很快就會(huì)死亡和產(chǎn)生組織腐敗,失去原有正常結(jié)構(gòu),因此,組織要經(jīng)固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細(xì)胞組織死亡,而能清晰辨認(rèn)其形態(tài)結(jié)構(gòu)。
冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接用切片機(jī)切片。它實(shí)際上是以水為包埋劑,將組織進(jìn)行冰凍至堅(jiān)硬后切片的。在冰凍切片前組織不經(jīng)過任何化學(xué)藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時(shí)間。同時(shí),由于此法不需要經(jīng)過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經(jīng)組織和一些組織化學(xué)的制片,并作為快速切片的方法應(yīng)用在臨床診斷
2)特點(diǎn):
石蠟切片標(biāo)本可以長期保存使用,為永久性顯微玻片標(biāo)本。
冰凍切片制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷.組織變化不大,能很好保存脂肪,類脂等成分。能夠比較完好地保存各種抗原活性及酶類,特別是對(duì)于那些對(duì)有機(jī)溶劑或熱的溫度耐受能力較差的細(xì)胞膜表面抗原和水解酶保存較好。
石蠟切片
(一)石蠟切片前的準(zhǔn)備
1.切片刀。傳統(tǒng)的切片刀在使用之前,一定要在顯微鏡下檢查刀口的損傷程度,然后進(jìn)行磨刀,F(xiàn)在也可以使用一次性刀片,可省去磨刀。
2.修整蠟塊:切去組織周圍過多的石蠟,一般情況下在組織周圍留有約1~2mm的石蠟邊,兩邊必須平行。
3.蠟塊固定:修整好的蠟塊先固定在事先準(zhǔn)備好的小方木塊或者金屬塊上,固定方法是把蠟鏟先在酒精燈上加熱,再將蠟塊底部烙熔,迅速烙粘在小方木塊或金屬塊底座上。
4.載玻片擦洗干凈后,在其表面涂上粘附劑(蛋白甘油、APES或多聚賴氨酸),根據(jù)染色方法選擇不同的粘附劑。
5.準(zhǔn)備好毛筆、鑷子、染色架。
6.調(diào)好展片器內(nèi)水的溫度(45℃),有時(shí)也可以加些酒精到水中。
(二)石蠟切片
1.將切片刀裝在刀片機(jī)的刀架上并固定緊,固定蠟塊底座或蠟塊,調(diào)整蠟塊與刀至合適位置,刀刃與蠟塊表面呈5度角。
2.切片多使用輪轉(zhuǎn)式切片機(jī),切片時(shí),左手執(zhí)毛筆,右手轉(zhuǎn)切片機(jī)轉(zhuǎn)輪,先修出組織塊。
3.調(diào)整切片機(jī)上 |