一、EndoSensTM細(xì)胞模型
原理
EndoSens是一種化合物皮膚致敏檢測(cè)的角質(zhì)細(xì)胞模型，通過(guò)定量檢測(cè)化合物處理細(xì)胞以后所引起的熒光素酶表達(dá)，作為皮膚致敏的體外檢測(cè)重要指標(biāo)。
用途
EndoSens皮膚致敏模型，不僅可以實(shí)現(xiàn)對(duì)單一化合物的準(zhǔn)確預(yù)測(cè)，還可以對(duì)復(fù)雜成分的化妝品中藥植物提取物進(jìn)行皮膚致敏性評(píng)價(jià)，具有較好的皮膚致敏預(yù)測(cè)能力，可用于化妝品原料安全性評(píng)估。
優(yōu)勢(shì)
EndoSens相較于現(xiàn)有的體外致敏模型,具有更高的靈敏度及準(zhǔn)確性。如下表1,EndoSens模型與KeratinoSensTM(德國(guó))及LuSens(法國(guó))相比,在靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度上都更勝一籌。
表1 Performance of EndoSens (me-too and me-better)
二、轉(zhuǎn)運(yùn)體單敲或雙敲Caco2細(xì)胞模型
原理
Caco-2細(xì)胞為人結(jié)腸腺癌細(xì)胞（the human colon adenocarcinoma cell lines），其結(jié)構(gòu)和生化作用類似于人小腸上皮細(xì)胞。近年來(lái)，Caco-2細(xì)胞常被用于口服藥物的吸收研究。本試驗(yàn)運(yùn)用Millicell裝置在24孔板建立了Caco-2單層細(xì)胞模型（見(jiàn)Fig.1）來(lái)研究待測(cè)藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)吸收。
Fig.1. Caco-2單層細(xì)胞模型
用途
Caco-2細(xì)胞模型被認(rèn)為是目前*的體外吸收模型，可用于快速評(píng)估新藥的細(xì)胞滲透性、闡明藥物轉(zhuǎn)運(yùn)的途徑評(píng)價(jià)提高膜通透性的方法、確定被動(dòng)擴(kuò)散的藥物最合適的理化性質(zhì)和評(píng)估新藥的潛在毒性作用等成為藥物吸收研究的必備手段。
優(yōu)勢(shì)
競(jìng)遠(yuǎn)生物的Caco-2細(xì)胞為ABC藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體靶向性敲除Caco2細(xì)胞系，該模型克服藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體研究中抑制劑的交叉抑制干擾，直接在細(xì)胞水平采用基因敲除的方法進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)體靶向性敲除缺失，是藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體研究的理想模型（見(jiàn)Fig.2）。Caco-2細(xì)胞作為藥物吸收研究的一種快速篩選工具，能夠在細(xì)胞及分子水平提供關(guān)于藥物分子通過(guò)小腸黏膜的吸收、代謝、轉(zhuǎn)運(yùn)的信息，對(duì)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的藥物進(jìn)行研究，同時(shí)由于Caco-2細(xì)胞來(lái)源于人體，該模型的研究結(jié)果與體內(nèi)藥物的處置有較好的相關(guān)性，其結(jié)果有較好的重現(xiàn)性。
Fig.2. ABC藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體靶向性敲除Caco2細(xì)胞系
三、CYPs誘導(dǎo)報(bào)告hepG2細(xì)胞模型
原理
結(jié)合CRISPR/Cas9與同源重組技術(shù)，建立系列藥物代謝酶Luc定點(diǎn)插入細(xì)胞模型，用于實(shí)時(shí)定量評(píng)估藥物CYPs誘導(dǎo)。
用途
CYPs實(shí)時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞模型，可用于模擬肝臟代謝反應(yīng)，用于研究藥物代謝對(duì)肝細(xì)胞CYPs表達(dá)的影響。
優(yōu)勢(shì)
由于定點(diǎn)插入LUC（熒光素酶基因），該細(xì)胞模型可實(shí)時(shí)定量評(píng)估藥物CYPs誘導(dǎo)，試驗(yàn)周期短，試驗(yàn)方法相對(duì)簡(jiǎn)單，可以快速評(píng)價(jià)藥物對(duì)肝細(xì)胞代謝的影響。
四、代謝酶穩(wěn)定高表達(dá)hepG 2細(xì)胞模型
原理
肝臟的細(xì)胞色素P450 (CYP)系統(tǒng)在藥物的代謝 |
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